论文部分内容阅读
目的 了解mir346和mir639对周期蛋白依赖激酶抑制剂2A(p16)基因表达的调控.方法 以定点突变法为基础,设计获得c.-21 C＞T和c.-34 G＞T p16INK4a5-UTR突变型.用选定的mirRNA和包含野生型和突变型p16INK4a5-UTR的pGL3质粒共转染.24小时后进行双萤光素酶试剂(Promega)检测分析和实时PCR定量分析.结果 Mir346和mir636相对mir639和mir935在MDF7和Mel28细胞有较高表达.随着mir346的导入,MCF7细胞野生型荧光酶活性显著降低(57％);突变型荧光酶活性也明显降低(39％).并且在mir346存在时,野生型和突变型都显示出相同程度的表达量.mir639对WM266细胞荧光酶活动没有表现出显著影响.结论 mir346在MCF7细胞可显著下调p16的表达,而mir639在WM266细胞对p16的表达没有显著影响.