热灭活植物乳杆菌ATCC 8014对UVB暴露皮肤细胞的抗光老化和抗黑色素生成作用研究

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【目的】中波紫外(UVB)照射是导致皮肤光老化形成和色素沉着的主要环境原因之一。植物乳杆菌是一种广泛研究的益生菌菌种。本研究利用UVB照射皮肤细胞(正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)和小鼠B16F10黑色素瘤细胞),探讨了热灭活植物乳杆菌ATCC 8014(LP)的抗光老化和抗黑色素生成作用。【方法】以暴露于UVB的正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)和小鼠B16F10黑色素瘤细胞为研究对象,用MTT法、TUNEL染色分析和DCFH-DA染色分析实验检测了两组细胞的细胞活力、DNA损伤及相对ROS水平;利用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测了NHDF细胞中的I型胶原蛋白水平;通过NaOH裂解法和多巴氧化法对B16F10细胞黑色素生成和酪氨酸酶活性进行测定;通过qRT-PCR分析和Western blotting分析检测光老化和黑色素生成相关基因和蛋白表达水平变化。【结果】(1)LP抑制UVB诱导的NHDF和B16F10细胞毒性,这与减少ROS介导的细胞DNA损伤有关;(2)LP下调基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-3和MMP-9(而不是MMP-2)mRNA水平[与抑制(ERK,p38)(而不是JNK)/c-Fos(而不是c-Jun)信号通路有关],增加I型前胶原(COL1A1)蛋白水平,从而提高I型胶原蛋白含量;(3)LP作为自噬诱导剂(增加LC3-II和Beclin 1蛋白水平以及LC3-II/LC3-I比率)抑制酪氨酸酶、酪氨酸相关蛋白-1(TYRP-1)和TYRP-2活性和/或表达(与压制PKA/CREB/MITF信号通路有关),从而降低黑色素含量。【结论】LP在UVB暴露的皮肤细胞中具有潜在的抗光老化和抗黑色素生成作用。
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