交感神经β2肾上腺素受体促进前列腺癌转移并抵抗肿瘤细胞的凋亡

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ycf0319
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目的探讨交感神经β2肾上腺素受体(β2 adrenergic receptor,β2AR)对前列腺癌细胞迁移、侵袭以及凋亡的影响。方法通过UALCAN数据库检索分析β2AR在人前列腺癌组织及癌旁组织中的基因表达水平及与患者年龄的相关性;通过免疫组织化学染色分析β2AR在29例前列腺癌组织中的蛋白表达水平。体外培养人前列腺癌细胞系PC-3、LNCaP,β2AR激动剂异丙肾上腺素(ISO,2μmol/L,24 h或1、12、24 h),β2AR抑制剂普萘洛尔(PRO,1μmol/L,24 h)处理细胞;β2AR RNAi慢病毒转染PC-3、LNCaP细胞,Western blot及RT-PCR分别检测β2AR的蛋白及mRNA水平。Transwell实验检测细胞迁移及侵袭。Western blot检测上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transformation,EMT)相关标记物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和凋亡相关蛋白Caspase3、cleaved-Caspase3及PARP的表达;流式细胞仪检测凋亡率;透射电镜观测细胞凋亡情况。结果 UALCAN数据库检索结果显示β2AR在前列腺癌患者组织中的基因表达高于正常前列腺组织(P<0.05);β2AR在41~60岁与61~80岁患者组间的表达差异不显著。29例前列腺癌患者组织的免疫组化结果显示,高风险患者(Gleason评分≥7)组织中β2AR蛋白水平高于低风险患者(Gleason评分<7)(P<0.001);细胞迁移及侵袭实验中,ISO处理组细胞迁移和侵袭增加(P<0.01),E-cadherin表达下调,N-cadherin和Vimentin表达上调(P<0.05);而PRO处理组及下调β2AR的表达后,细胞迁移和侵袭减少(P<0.01),E-cadherin表达上调,N-cadherin和Vimentin表达下调(P<0.05)。细胞凋亡实验中,ISO处理组细胞凋亡率降低,Caspase3、cleaved-Caspase3、PARP的表达明显降低(P<0.05),而PRO处理组及下调β2AR的表达细胞凋亡率明显增高,且Caspase3、cleaved-Caspase3、PARP的表达增高(P<0.05)。结论β2AR能够促进细胞EMT的形成,增加前列腺癌细胞的迁移、侵袭能力,并且通过下调凋亡相关蛋白的表达,对细胞凋亡产生抵抗作用,从而促进肿瘤转移。
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