【摘 要】
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目的 探讨维甲酸诱导基因-Ⅰ(RIG-I)在诱导HBV感染IFN产生中的影响,以期对阐明乙型肝炎慢性化机制,寻找新的治疗靶点提供新的思路.方法 以RIG-I表达载体flagRIG-I-fult转染培
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科
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目的 探讨维甲酸诱导基因-Ⅰ(RIG-I)在诱导HBV感染IFN产生中的影响,以期对阐明乙型肝炎慢性化机制,寻找新的治疗靶点提供新的思路.方法 以RIG-I表达载体flagRIG-I-fult转染培养6孔板中的HepG2、HepG2.2.15,24 h后用水疱性口炎病毒(VSV)感染细胞,然后在0、8、16和24 h收集细胞及培养上清液,采用quantitive RTPCR、Western印迹检测RIG-I、MDA5、IPS-1、ISG54等基因的表达,ELISA检测培养上清液中分泌的IFN-β水平.结果 HepG2.2.15细胞在VSV感染后IFN-β分泌水平(11.18±1.34) pg/mL明显低于HepG2细胞(275.50±22.97) pg/mL (P＜0.01)；通过质粒flagRIG-I-ful1转染高表达RIG-I后,HepG2.2.15分泌IFN-β的能力恢复至(548.78±57.99) pg/mL 与HepG2细胞(532.10±39.34) pg/mL接近的水平(P=0.7013).结论 HepG2.2.15细胞感染VSV后IFN产生障碍,高表达RIG-I后IFN表达水平得到恢复,提示RIG-I功能缺陷导致抗病毒免疫应答降低,RIG-I可能在HBV感染清除中起重要作用.
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