分析不同幅度牵张力对正常皮肤成纤维细胞(NSFB)向增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)转化的诱导作用。
方法体外培养增生性瘢痕患者的NSFB和HSFB。加载牵张力的NSFB作为实验组,分N10%组、N15%组和N20%组3组,分别加载幅度为10%、15%、20%的周期性牵张力24 h,不加载牵张力的NSFB和HSFB作为对照组(N0组和H0组)。通过观察细胞形态,以细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,实时定量荧光PCR法检测整合素β1、P130Cas、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原a1链(COL1A1)、Ⅲ型胶原a1链(COL3A1)的基因表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1蛋白表达,分析NSFB的转化程度。
结果机械牵张力刺激NSFB增殖,N10%组细胞增殖水平显著高于N20%组(0.91±0.09比0.8±0.07,P<0.05)。牵张力作用下各个基因表达上调,N10%组整合素β1、P130Cas、TGF-β1、COL1A1、COL3A1的mRNA表达水平均显著高于N20%组(3.14±0.24、5.01±0.49、1.55±0.08、2.38±0.08、1.37±0.11比1.78±0.32、3.07±0.41、1.18±0.05、1.97±0.05、1.26±0.19,均P<0.05)。机械牵张力引起TGF-β1蛋白表达上调,N10%组TGF-β1的蛋白表达水平显著高于N20%组[(459±12.96)比(372±10.49)pg/ml,P<0.05]。实验组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平均显著高于N0组,但低于H0组(均P<0.05);N10%组Ⅰ型胶原蛋白表达水平显著高于N20%组[(12.66±1.16)比(11.23±0.75)ng/ml,P<0.05]。
结论10%幅度牵张力对NSFB有明显的诱导转化作用,能够使NSFB表现出HSFB的部分生化特征。