不同幅度牵张力对正常皮肤成纤维细胞向增生性瘢痕成纤维细胞转化的诱导作用

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目的

分析不同幅度牵张力对正常皮肤成纤维细胞(NSFB)向增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)转化的诱导作用。

方法

体外培养增生性瘢痕患者的NSFB和HSFB。加载牵张力的NSFB作为实验组,分N10%组、N15%组和N20%组3组,分别加载幅度为10%、15%、20%的周期性牵张力24 h,不加载牵张力的NSFB和HSFB作为对照组(N0组和H0组)。通过观察细胞形态,以细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,实时定量荧光PCR法检测整合素β1、P130Cas、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原a1链(COL1A1)、Ⅲ型胶原a1链(COL3A1)的基因表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1蛋白表达,分析NSFB的转化程度。

结果

机械牵张力刺激NSFB增殖,N10%组细胞增殖水平显著高于N20%组(0.91±0.09比0.8±0.07,P<0.05)。牵张力作用下各个基因表达上调,N10%组整合素β1、P130Cas、TGF-β1、COL1A1、COL3A1的mRNA表达水平均显著高于N20%组(3.14±0.24、5.01±0.49、1.55±0.08、2.38±0.08、1.37±0.11比1.78±0.32、3.07±0.41、1.18±0.05、1.97±0.05、1.26±0.19,均P<0.05)。机械牵张力引起TGF-β1蛋白表达上调,N10%组TGF-β1的蛋白表达水平显著高于N20%组[(459±12.96)比(372±10.49)pg/ml,P<0.05]。实验组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平均显著高于N0组,但低于H0组(均P<0.05);N10%组Ⅰ型胶原蛋白表达水平显著高于N20%组[(12.66±1.16)比(11.23±0.75)ng/ml,P<0.05]。

结论

10%幅度牵张力对NSFB有明显的诱导转化作用,能够使NSFB表现出HSFB的部分生化特征。

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