目的高效液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS)同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和右氯苯那敏浓度。方法样品用甲醇进行沉淀蛋白后进样,Zorbax Eclipse TC-C18色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸的1mmol.L-1甲酸铵溶液,采用梯度洗脱进行分离,3200QTRAP型质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测。结果对乙酰氨基酚线性范围为:0.05～20μg.mL-1,定量下限为0.05μg.mL-1,准确度与精密度结果显示对乙酰氨基酚日间、日内RSD均≤5.50%,相对偏差-8.08%～5.73%,方法提取回收率92.0%～99.0%,稳定性测定值与添加值的相对偏差均<15%;右氯苯那敏线性范围为:0.05～20ng·mL-1,定量下限为0.05ng·mL-1,准确度与精密度结果显示右氯苯那敏日间、日内RSD均≤13.71%,相对偏差-1.29%～1.71%,方法提取回收率89.8%～101.4%,稳定性测定值与添加值的相对偏差均<15%。结论本研究所建立的方法快速、灵敏、专属性强、重复性高,可用于同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和右氯苯那敏浓度。