【摘 要】
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本试验旨在制备有高生物活性的重组蓖麻毒素A链（r-RTA）并与天然蓖麻毒素（n-RT）进行毒性比较。根据NCBI公布的RTA序列合成基因片段，并将其克隆于pET28a载体后，利用大肠杆菌进行原核
【机 构】
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吉林农业大学动物科学技术学院,军事医学科学院军事兽医研究所,吉林省畜牧总站
【基金项目】
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国家自然基金（31101858）,总后科研重大项目（AWS12J005）
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本试验旨在制备有高生物活性的重组蓖麻毒素A链（r-RTA）并与天然蓖麻毒素（n-RT）进行毒性比较。根据NCBI公布的RTA序列合成基因片段，并将其克隆于pET28a载体后，利用大肠杆菌进行原核表达，镍柱亲和层析纯化上清，500mmol／L咪唑溶液洗脱获得可溶性r-RTA蛋白，通过SDS-PAGE及Western blotting对其进行鉴定并用ELISA测定其免疫原性后，对r—RTA与n-RT进行动物和细胞试验毒性比较研究。结果显示，该r-RTA在上清中表达率为31．2％；每升细菌培养物纯化后可得20m
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