建立产生gfp报道基因重组EB病毒细胞株

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gloria2

【摘要】

：

【作者】

：

陈小毅 John R.Arrand

【机构】

：

524023,湛江,广东医学院病理教研室,DepartmentofMolecularBiology,PatersonInstituteforCancerResearch,ChristieHospita

【出处】

：

中华微生物学和免疫学杂志

【发表日期】

：

2003年23期

【关键词】

：

EB病毒 gfp 报道基因重组病毒基因重组转染细胞选择基因穿梭质粒病毒株电穿孔法

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目的建立产生带有gfp报道基因的重组EB病毒株. 方法构建一个有EBV DNA BamHⅠ的C和H片段、gfp报道基因和puromycin选择基因的真核细胞穿梭质粒(pGFPUROEB);采用电穿孔法将其转染于B95-8细胞中,并用荧光显微镜和流式细胞仪检测gfp的表达,PCR及Southern blot检测重组gfp EB病毒基因. 结果经puromycin的长期筛选,建立80%以上表达gfp的B95-8细胞株(称gfpB95-8),PCR检测有gfp基因;经Southern blot检测证实gfpB95-8可产生重组gfp的EB病毒. 结论构建了gfp报道基因和puromycin选择基因的真核细胞穿梭质粒;并成功建立产生带有gfp报道基因的重组EB病毒株.

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