探讨人miRNA-181a-5p对胃癌细胞转移的影响及其作用机制。
方法采用实时荧光定量(qRT)-PCR检测miRNA-181a-5p在胃癌细胞系GC9811及其腹膜高转移细胞系GC9811-P中的表达。将miRNA-181a-5p的内源性人工合成模拟物mimic和无关阴性对照转染胃癌细胞系GC9811分别作为上调组和上调对照组；将miRNA-181a-5p的miRNA抑制子和无关阴性对照转染胃癌腹膜高转移细胞系GC9811-P分别作为下调组和下调对照组。采用MTT比色试验、平板克隆形成试验、Transwell体外迁移实验、划痕体外迁移实验和细胞凋亡实验以验证上调和下调miRNA-181a-5p后胃癌细胞的增殖、转移和凋亡能力的变化；采用蛋白质印迹法验证上调及下调miRNA-181a-5p、基质金属蛋白酶(MMP)14蛋白质水平的表达变化。两样本均数之间的比较采用独立样本t检验，率的比较采用卡方检验。
结果qRT-PCR结果显示，miRNA-181a-5p在GC9811中的相对表达量为(1.000 00±0.021 26)，在GC9811-P中为(3.175 61±0.106 76)，差异有统计学意义(t＝34.620，P<0.01)。MTT比色法显示，上调组细胞增殖速率高于上调对照组，而下调组低于下调对照组。平板克隆实验显示上调组的克隆形成数和克隆形成率分别为234.00±10.12和46.8%，上调对照组为93.00±9.61和18.6%，差异均有统计学意义(t＝17.500，χ2＝12.27，P均<0.01)；下调组为51.00±7.96和10.2%，下调对照组为99.00±8.05和19.8%，差异亦均有统计学意义(t＝7.344，χ2＝9.51，P均<0.01)；Transwell迁移实验结果显示，上调组迁移出微孔膜的细胞数为(164.00±19.31)个，高于上调对照组[(87.00±23.04)个，t＝4.436，P<0.05]；下调组为(157.00±11.50)个，低于下调对照组[(234.00±12.12)个，t＝7.982，P<0.05]。划痕实验显示，上调组的迁移距离比为2.09±0.18，上调对照组为1.27±0.23；下调组为1.15±0.15，下调对照组为1.67±0.12，上调组和下调组分别与其对照组比较，差异均有统计学意义(t＝4.863、4.689，P均<0.01)。凋亡试验结果显示上调组的凋亡率为(6.10±1.02)%，上调对照组为(9.10±2.13)%，下调组为(12.70±1.23)%，下调对照组为(8.70±2.54)%，上调组和下调组分别与其对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。蛋白质印迹法结果显示上调组的灰度值为561.881±35.740，高于上调对照组的275.784±23.520；下调组为579.565±37.950，低于下调对照组的1 312.760±51.270，差异均有统计学意义(t＝11.580、19.910，P均<0.01)。
结论miRNA-181a-5p在胃癌腹膜高转移细胞系GC9811-P中高表达；它可促进胃癌细胞GC9811、GC9811-P增殖与迁移的能力，有抑制凋亡的趋势。