大鼠热休克蛋白47真核表达载体的体外构建

来源 :口腔颌面外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tiger5156
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目的:体外构建大鼠热休克蛋白47(47 kDa heat shock protein,HSP47)的荧光真核表达载体,并检测其在鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3中的表达.方法:应用RT-PCR方法从大鼠肝脏中分离、扩增目的片断,双酶切定向克隆到真核表达载体pTracer-CMV中,构成重组质粒pTracer-CMV-HSP47,测序验证.通过脂质体介导质粒瞬时转染NIH/3T3细胞,Western b1otting和免疫细胞化学检测HSP47及Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)的表达变化.结果:通过RT-
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