论文部分内容阅读
目的 探讨他莫昔芬(TAM)对三阴乳腺癌(TNBC) MDA-MB-468细胞耐受饥饿的影响,研究G蛋白偶联雌激素受体-自噬相关蛋白Beclin-1(GPER-Beclin-1)通路在其中的作用.方法 用血清饥饿方法建立模型细胞,并分为对照组和实验组.另取常规培养的MDA-MB-468细胞作为空白组.对照组和实验组分别以1%二甲基亚砜和5 μmol·L-1TAM处理48 h,空白组常规培养48 h.用siRNA转染技术沉默模型细胞中GPER表达,并分为GPER-NC组(空载转染)和GPER-si组(转染GPER).GPER-NC组和GPER-si组均以5μ mol·L-1 TAM处理8h.用结晶紫染色法检测细胞贴壁存活率,用蛋白印迹法检测LC3B和Beclin-1蛋白表达,并评估自噬能力.结果 血清饥饿48 h,实验组、对照组和空白组细胞的贴壁存活率分别为(128.77±6.66)%,(101.00±3.26)%和(177.25±4.45)%,LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ相对蛋白表达量分别为(142.15±5.25)%,(100.33±4.55)%和(65.34±8.78)%,Beclin-1相对蛋白表达量分别为(156.22±7.88)%,(101.25±3.80)%和(97.97±8.90)%,实验组和对照组的上述指标比较,差异均有统计学意义(均P <0.05).血清饥饿48h,GPER-NC组和GPER-si组细胞的贴壁存活率分别为(103.55±6.68)%和(49.74±5.15)%,LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ相对蛋白表达量分别为(98.36±6.68)%和(64.54±5.25)%,Beclin-1相对蛋白表达量分别为(105.39±6.68)%和(31.03±8.76)%,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 TAM能增强TNBC MDA-MB-468饥饿耐受能力,该效应可能与GPER-Beclin-1通路激活自噬有关.