【摘 要】
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目的 探讨产生MET抑制剂耐药性的分子机制.方法 MKN45细胞培养好以后,使用MET特异性抑制剂PHA-665752 (250 nmol)或多西环素(DOXY,1μg/ml)诱导的shRNA系统使MET基因沉默,计算不同处理组(未处理组、EGF组、Gefitinib组和EGF+ Gefitinib组)MKN45细胞的存活率,同时通过Western-Bolt方法检测表皮生长因子受体(EGFR)、M
【机 构】
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461000河南省许昌市人民医院普外科
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目的 探讨产生MET抑制剂耐药性的分子机制.方法 MKN45细胞培养好以后,使用MET特异性抑制剂PHA-665752 (250 nmol)或多西环素(DOXY,1μg/ml)诱导的shRNA系统使MET基因沉默,计算不同处理组(未处理组、EGF组、Gefitinib组和EGF+ Gefitinib组)MKN45细胞的存活率,同时通过Western-Bolt方法检测表皮生长因子受体(EGFR)、MET、AKT和MAPK的磷酸化水平.结果 PHA-665752或多西环素(DOXY)处理后,抑制MET基因表达,导致细胞存活率严重下降(P＜ 0.001),同时EGFR、MET、AKT和MAPK的磷酸化水平亦严重下降.然而,加入EGF后,细胞存活状况得到明显改善(P＜0.001或P＜0.01),并且AKT和MAPK的磷酸化水平明显上升.结论 激活表皮生长因子受体EGFR增强MKN45细胞对MET抑制剂的耐受性可能是AKT/MAPK信号通路发挥作用的。
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