人支气管上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合酶催化亚单位基因转录的调控

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目的:研究人支气管上皮细胞谷胱甘肽(GSH)合成的限速酶γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)催化亚单位(GCLC)基因转录调控。方法:通过PCR的方法克隆GCLC基因的部分转录调控区基因,构建表达虫荧光素酶报告基因的质粒;采用外切核酸酶Ⅲ结合S1核酸酶的方法构建了GCLC基因部分转录调控区基因的嵌套缺失体;基因转染上述质粒,通过虫荧光素酶报告基因的表达分析揭示嵌套缺失体突变基因的转录调控功能。结果:人GCLC基因转录起始位点上游-2515~-2236bp、-864838bp、-769~-538bp、-42
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