【摘 要】
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成纤维细胞生长因子21(FGF21)是近期发现的糖脂代谢调节因子,其安全、有效和不依赖胰岛素调节血糖的特点,使其有望成为治疗糖尿病的新型药物。为研究人FGF21(h-FGF21)在大肠
【机 构】
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东北农业大学生命科学学院,河南师范大学生命科学学院,
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成纤维细胞生长因子21(FGF21)是近期发现的糖脂代谢调节因子,其安全、有效和不依赖胰岛素调节血糖的特点,使其有望成为治疗糖尿病的新型药物。为研究人FGF21(h-FGF21)在大肠杆菌细胞周质表达,本实验在pET27b载体PelB(pectate lyase B)信号肽下游连入h-FGF21基因,成功构建了pET27bPelB-h-FGF21重组质粒,并发现pET27bPelB-h-FGF21转化E.coliBL21(含DE3)经诱导后能够在细胞周质成功地表达h-FGF21,表明PelB信号肽在h-FGF21细胞周质表达中起到了关键作用。经周质蛋白提取和两步离子交换层析,利用灰度分析软件分析得到了纯度大于95%的h-FGF21蛋白,SDS-PAGE与Western blotting结果证明了目的蛋白大小约20 k Da;经HepG2细胞的葡萄糖吸收实验以及在II型糖尿病db/db小鼠上的短期和长期血糖变化实验结果表明,细胞周质表达的h-FGF21(ph-FGF21)与胞内表达的FGF21(ih-FGF21)的生物学活性在统计学上无显著差异。
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