【摘 要】
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目的 研究构建可以稳定表达HBx和Micro RNA-21基因的肝卵圆细胞株的方法 。方法 采用LE培养基培养大鼠卵圆细胞株(LE/6),以质粒Pc DNA3.1-HBVx中的HBVx序列为模板,PCR法扩增得
【基金项目】
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江西省自然科学基金资助项目(2012zBAB205001),江西省科技厅支撑计划项目(20112BBG70037),江西省赣州市指导性科技计划任务(2011)
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目的 研究构建可以稳定表达HBx和Micro RNA-21基因的肝卵圆细胞株的方法 。方法 采用LE培养基培养大鼠卵圆细胞株(LE/6),以质粒Pc DNA3.1-HBVx中的HBVx序列为模板,PCR法扩增得到目的基因片段A。将HBx目的基因片段和质粒载体p EGFP-Nl进行双酶切,线性化得到重组质粒命名为p EGFP-HBx。重组质粒转化感受态大肠埃希菌DH5a,并进行筛选培养。用脂质体法将质粒转染卵圆细胞,作为p EGFP-HBx组;用脂质体法将质粒转染质粒载体p EGFP-Nl,作为p EGFP
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