表达外源基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染性克隆的构建及病毒拯救

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chen_chen1111

【摘要】

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为建立表达标记基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）反向遗传操作平台，本研究在PRRSVHuN4．F112疫苗株感染性分子克隆的基础上，采用突变PCR技术将新城疫病毒（NDV）NP蛋白末端优势

【作者】

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徐彦召周艳君童武李玲姜一峰童光志

【机构】

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中国农业科学院上海兽医研究所

【出处】

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农业生物技术学报

【发表日期】

：

2012年5期

【关键词】

：

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 感染性cDNA 标记基因拯救病毒 Porcine reproductive and respiratory syndro

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划（863）项目（No.2011AAl0A208）、国际合作项目（No.2010DF33920）、NSFC.广联合基金项目（No.U0931003）、国家自然科学基金项目（No.31100121）和中央科研院所公益性基础科研业务费项目（No.2011JB03）

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为建立表达标记基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）反向遗传操作平台，本研究在PRRSVHuN4．F112疫苗株感染性分子克隆的基础上，采用突变PCR技术将新城疫病毒（NDV）NP蛋白末端优势抗原区插入PRRSVNSP2蛋白的复制非必须区，经基因片段的克隆、拼接，构建了含有外源标记基因的感染性的PRRSVcDNA克隆psk-HuN4．F112-A52＋NP49。用限制性内切酶Swa I将psk-HuN4．F112．A52＋NP49线性化后通过细胞外转录获得病毒RNA，用脂质体法将病毒RNA转染叙利

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