犬瘟热病毒N基因原核表达质粒的构建

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为了对N蛋白表达作为诊断用抗原、检测犬瘟热病毒(CDV)特异性抗体提供参考依据,以已构建的含犬瘟热病毒N基因的pMD18-N质粒为模板,利用特异性引物进行PCR扩增,得到1 572 bp的N基因开放阅读框,将所得N基因克隆至经相同双酶切处理后的pET32a(+)原核表达载体中,获得重组质粒pET32a(+)-N,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。测序结果显示,目的基因插入位置和阅读框正确,经IPTG诱导表达出分子量约为75 kDa的重组N蛋白。
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