长链非编码RNA HOTAIR通过Wnt/β-catenin信号通路对肾母细胞瘤细胞增殖凋亡及耐药的影响

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目的

探讨长链非编码RNA(LncRNA)HOTAIR对肾母细胞瘤细胞增殖、凋亡与耐药性的影响及分子机制。

方法

收集2015—2019年于郑州大学附属儿童医院手术治疗的32例肾母细胞瘤患儿的肾母细胞瘤组织和癌旁正常组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测肾母细胞瘤组织和癌旁组织中HOTAIR的表达,CCK-8法检测细胞的增殖能力,流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡水平,Western blot检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达,CCK-8检测转染后经过不同浓度顺铂处理下的细胞增殖抑制情况。

结果

HOTAIR在肾母细胞瘤组织中的表达水平为2.02±0.18,高于癌旁组织(0.61±0.04,P<0.05)。si-HOTAIR组细胞中Wnt、β-catenin、Cyclin D1、c-myc蛋白的表达水平分别为0.54±0.05、0.41±0.05、0.25±0.03和0.56±0.06,均低于对照组(分别为0.89±0.08、0.94±0.10、0.72±0.06和1.10±0.11)和si-RNA组(分别为1.06±0.11、0.92±0.08、0.66±0.07和1.25±0.11,均P<0.05)。转染24、48和72 h后,si-HOTAIR组细胞的吸光度值分别为0.31±0.02、0.37±0.04和0.69±0.07,均低于对照组(分别为0.49±0.05、0.78±0.08和1.22±0.14)和si-RNA组(分别为0.57±0.06、0.68±0.07和0.94±0.09,均P<0.05)。si-HOTAIR组细胞的凋亡率为(13.81±1.25)%,高于对照组[(6.54±0.72)%]和si-RNA组[(4.35±0.40)%,均P<0.05];si-HOTAIR组细胞的TUNEL阳性细胞率为(35.14±3.50)%,高于对照组[(20.16±2.18)%]和si-RNA组[(21.09±2.35)%,均P<0.05]。si-HOTAIR组细胞的半数抑制浓度为(62.48±5.97)μmol/L,均低于对照组[(88.27±9.05)μmol/L]和si-RNA组[(92.50±9.11)μmol/L,均P<0.05]。

结论

抑制LncRNA HOTAIR的表达可抑制肾母细胞瘤细胞的增殖活性,促进细胞凋亡,降低细胞对顺铂的耐药性,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。

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