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以菊花花瓣诱导的胚性愈伤组织分离原生质体。用含0.2%琼脂糖的KM8P培养基进行薄层漂浮看护培养,培养基中附加2,4-D0.3mg·L^-1,NAA1.0mg·L^-1,zeatin0.2mg·L^-1。原生质体培养密度4 ̄5×10^4mL,25℃暗培养。5天后再生细胞开始进行第一次分裂,第10天分裂频率可达20.5%。约1个月形成肉眼可见的小愈伤组织,植板率4%。小愈伤组织转移到附加NAA1.5