【摘 要】
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目的 比较脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)对多能干细胞诱导的人源心肌细胞(human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes,hiPS-CMs)及原代新生大鼠心肌细
【机 构】
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广州医科大学附属第二医院急诊科,广州 510260
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目的 比较脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)对多能干细胞诱导的人源心肌细胞(human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes,hiPS-CMs)及原代新生大鼠心肌细胞(cardiomyocytes,CMs)的影响.方法 不同浓度LPS处理hiPS-CMs和原代新生大鼠CMs 24～48 h,通过实时无标记细胞分析技术(xCELLigence Real-Time Cell Analyser Cardio system RTCA)观察hiPS-CMs和原代新生大鼠CMs的电生理变化;qRT-PCR方法检测NPPB mRNA表达水平和qPCR阵列法检测炎性基因表达水平.结果 不同浓度LPS刺激后,原代新生大鼠CMs的电生理变化为搏动频率增加和搏动幅度减少(P＜0.01),NPPB mRNA表达水平增加(P＜0.01).在hiPS-CMs中,相对应的LPS浓度刺激未能引起搏动幅度和搏动频率显著变化(P＞0.05),NPPB mRNA表达水平未显著增加(P＞0.05).进一步增加浓度(2.5 μg/mL～40 μg/mL),hiPS-CMs的搏动幅度和搏动频率仍未发生明显变化(P＞0.05),NPPB mRNA在高浓度LPS(5 μg/mL～40 μg/mL)发生差异性改变(P＜0.01).最后,在炎症相关基因表达方面,原代新生大鼠CMs表现为C3、Gpnmb、Atf3、I16r和Ly96基因水平上调至1.5倍,hiPS-CMs 表现为 AK4、TOLLIP、SPP1、FABP1、IL6R、LY96和C3基因水平上调至1.5倍.结论 与原代新生大鼠CMs相比,hiPS-CMs受到LPS的损伤明显减轻,表现出不同的炎症基因表达模式.
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