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目的
探讨抑制第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源等位基因(PTEN)活性对缺氧缺血神经元凋亡的保护作用及机制。
方法培养新生SD大鼠皮质神经元，建立体外神经元氧糖剥夺(OGD)模型模拟细胞缺氧缺血。细胞分为3组：1.正常对照组：正常培养液孵育的神经元；2.OGD组：模型制备后，取再灌注后0.5、3.0、6.0、12.0、24.0、48.0 h神经元进行观察；3.PTEN抑制剂过氧钒酸钠(bpv)干预组：应用bpv处理神经元，再制备OGD模型，于再灌注后24 h观察。应用末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记法检测神经元凋亡，Western blot检测PTEN、p－PTEN、蛋白激酶B(Akt)、p－Akt、糖原合成酶激酶-3β(GSK－3β)、p-GSK-3β、抗凋亡蛋白髓细胞淋巴瘤-1(Mcl－1)蛋白表达。
结果1.与正常对照组比较，OGD神经元凋亡增加(P<0.05), PTEN表达增加，p－PTEN、p－Akt、p－GSK－3β及Mcl－1的表达降低(P均<0.05)，而Akt及GSK－3β表达未发生变化(P均>0.05)。2.与OGD组比较，bpv干预后神经元凋亡减少(P<0.05)，p－PTEN、p－Akt、p－GSK－3β和Mcl－1的表达增加(P均<0.05)，而PTEN、Akt及GSK－3β并未发生变化(P均>0.05)。
结论缺氧缺血诱导神经元凋亡发生，PTEN/Akt/GSK－3β/Mcl－1信号通路参与调控其凋亡。抑制PTEN活性后，Akt及GSK－3β磷酸化水平增加，使Mcl－1泛素化降低，从而减少神经元凋亡。