【摘 要】
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目的 探讨马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)致小鼠急性肝损伤的分子机制.方法 雄性C57BL/6小鼠15只,随机分为正常组(n=6)和处理组(n=9).处理组小鼠以AAⅠ20 mg/kg剂量腹腔注射,连续5 d,第6天处死、取材.检测血清ALT、AST,HE染色观察肝组织学变化;两组各随机选择3例肝组织样本提取RNA进行高通量转录组测序.通过生物信息学分析和功能预测筛选出表达显著的差异基因;再采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对部分差异基因进行验证.计量资料两组间差异比较采用t检验.结果 与正常组比较,处理组AL
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所,上海201203;上海市中医临床重点实验室,上海201203;上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所,上海201203;上海市中医临床重点实验室,上海201203
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目的 探讨马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)致小鼠急性肝损伤的分子机制.方法 雄性C57BL/6小鼠15只,随机分为正常组(n=6)和处理组(n=9).处理组小鼠以AAⅠ20 mg/kg剂量腹腔注射,连续5 d,第6天处死、取材.检测血清ALT、AST,HE染色观察肝组织学变化;两组各随机选择3例肝组织样本提取RNA进行高通量转录组测序.通过生物信息学分析和功能预测筛选出表达显著的差异基因;再采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对部分差异基因进行验证.计量资料两组间差异比较采用t检验.结果 与正常组比较,处理组ALT、AST水平明显升高(t值分别为4.331、4.947,P值均2倍且P<0.05]获得差异基因共计1352个,其中上调基因703个,下调基因649个.对这些差异性表达的基因进行GO和KEGG富集分析(P<0.05),小分子分解代谢、中性粒细胞参与的免疫应答、分泌颗粒细胞质囊泡腔、细胞质囊泡腔、细胞外结构组织、细胞外基质组织等相关的GO分类呈显著富集;化学致癌、视黄醇代谢、花生四烯酸代谢、类固醇激素合成、癌症中的转录失调、蛋白质消化和吸收、炎症介质对TRP通道的调节、药物代谢、补体和凝血级联、谷胱甘肽代谢、PPAR信号通路等在KEGG通路中显著富集.聚类分析发现明显下调基因包括Srd5a1、Lipc、Aqp8、Hba-a1、Slco1a1、Pklr等,采用qRT-PCR得以证实(P值均<0.05).结论 AAⅠ有明显急性肝毒性,其毒性主要涉及化学致癌、视黄醇代谢、花生四烯酸代谢、类固醇激素合成、癌症中的转录失调等环节.
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