【摘 要】
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参照GenBank中的猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropeumoniae,App)血清1和3型菌株序列设计了1对特异性引物,用PCR方法扩增毒素Ⅳ(ApxⅣ)基因3'端1 096bp的目的片
【机 构】
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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏省农科院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室,南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
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参照GenBank中的猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropeumoniae,App)血清1和3型菌株序列设计了1对特异性引物,用PCR方法扩增毒素Ⅳ(ApxⅣ)基因3'端1 096bp的目的片段,然后克隆到pMD18-T载体中,转入大肠杆菌(Es-cherichia coli)的宿主菌DH5a中,提取阳性克隆质粒进行双酶切和测序鉴定,将T-载体中切下目的片段定向克隆到pET32a(+)中,转入E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导可表达分子量约60 kD的蛋白
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