【摘 要】
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原核表达牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NS3蛋白,并以此免疫动物制备多克隆抗体.对BVDV NS3蛋白的抗原决定簇氨基酸序列分析,构建重组质粒pET30a-NS3,转化至E.coli BL21(DE3)感受态
【机 构】
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石河子大学动物科技学院,新疆石河子 832000
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原核表达牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NS3蛋白,并以此免疫动物制备多克隆抗体.对BVDV NS3蛋白的抗原决定簇氨基酸序列分析,构建重组质粒pET30a-NS3,转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,使用IPTG诱导目的蛋白表达.选择最优诱导条件对目的蛋白进行亲和纯化,目的蛋白主要以包涵体形式表达,从而获得NS3蛋白.使用NS3蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗NS3蛋白多克隆抗体,采用ELISA方法检测多克隆抗体效价.结果显示,成功表达并纯化出BVDV NS3蛋白,制备的兔抗NS3蛋白多克隆抗体效价大于1:128000,为建立BVDV抗体/抗原检测方法及疫苗的研究奠定了基础.
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