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目的
建立一种表面增强拉曼光谱(SERSp,也称拉曼分子指纹谱)分析技术检测滤纸干血片方法,探索用于筛查新生儿先天性甲状腺功能减低症(CH)的可能性和可靠性。
方法本研究为病例对照研究。新生儿滤纸干血片标本和有关CH-hTSH筛查检测结果与诊断结论由作者在上海儿童医院新生儿筛查中心提供,SERSp实验在大连理工大学合作完成。选取经常规时间分辨荧光免疫法检测促甲状腺素(TSH)浓度筛查CH(CH-hTSH)后确诊阴性和阳性滤纸干血片标本各6份,检测滤纸干血片水溶液表面增强拉曼光谱,以725 cm-1谱线为内标,分析得到的拉曼分子指纹谱;使用特征谱线分析,主成分分析方法(PCA)及PCA分群散点图分析,比较TSH检测结果。
结果用725 cm-1拉曼峰为内标,对照CH阴/阳性标本的SERSp实验结果,发现1373和1400 cm-1两谱线用于分析CH的阴性和阳性的相对峰高差最大,提示1373和1400 cm-1两条谱线可能为CH的特征谱线;而TSH的三条拉曼特征谱线(785、827和853 cm-1)的阴性/阳性的相对峰高差异很小,用于TSH的特征峰进行CH-拉曼筛查尚存在困难;12例SERSp检测结果用主成分分析方法、PCA分群散点图和1373和1400 cm-1两条CH特征谱分析方法均证实,CH-拉曼筛查与用荧光免疫检测CHhTSH筛查的结果基本相符,其符合率为91.7%,CH-拉曼筛查方法的灵敏度为100%,特异性为83.3%。
结论初步成功地开拓了一种采用SERSp检测分析的CH-拉曼筛查新方法,证实将足跟滤纸血片-SERSp分析技术应用于新生儿CH筛查有很好的前景。(中华检验医学杂志,2013,36:529-533)