在真核细胞中表达Zhejiang Children′s Hospital (ZCH)-7-2F9(简称2F9)单链抗体(scFv_2F9)以获得高活性的目的蛋白，为2F9其他类型的基因工程抗体及其免疫毒素的研究奠定基础。

根据pSectag2A多克隆位点、(G₄S)₃及scFv_2F9基因序列，设计含有SfiI、EcoRI酶切位点、6×His以及终止密码TGA的引物，采用高保真的Taq酶，通过重叠延伸拼接法(splicing by overlap extension，SOE)扩增克隆到scFv_2F9基因，将扩增到的目的基因片段克隆到pGEM T-easy载体，测序核实后再克隆到pSectag2A真核分泌型表达载体中。阳性重组质粒pSectag2A/scFv_2F9转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞进行目的蛋白的瞬时表达，将培养上清浓缩后，流式细胞术观察其对亲本单抗的阻滞效果。

真核分泌型表达载体pSectag2A/scFv_2F9在CHO细胞中获得成功表达，其相对分子质量为31 000。亲本直标单抗2F9-FITC被真核细胞表达的scFv_2F9阻滞后其阳性细胞百分数、平均荧光强度和最高峰值分别下降了90.02%、63.30%和63.38%。

克隆到的2F9V_H和2F9V_L基因及构建的真核分泌型表达载体pSectag2A/scFv_2F9是正确的，scFv_2F9在CHO细胞中获得成功的表达，且有较高的识别和结合人CD14抗原的功能。