【摘 要】
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为制备敏感性好、亲和力高、特异性强的抗沙拉沙星（Sarafloxacin,SARA）单克隆抗体,采用碳二亚胺法合成SARA人工抗原,通过免疫BALB/c小鼠,选择血清效价高且敏感性好的小鼠,采用
【机 构】
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河南科技学院食品学院; 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室; 河南农业大学牧医工程学院;
【基金项目】
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2015年河南省科技攻关项目(152102310094);河南省高校科技创新团队支持计划项目(13IRTSTHN006)
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为制备敏感性好、亲和力高、特异性强的抗沙拉沙星（Sarafloxacin,SARA）单克隆抗体,采用碳二亚胺法合成SARA人工抗原,通过免疫BALB/c小鼠,选择血清效价高且敏感性好的小鼠,采用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,筛选分泌抗SARA单克隆抗体（Monoclonal antibody,mAb）的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备SARA mAb,通过间接ELISA和间接竞争ELISA对SARA mAb的免疫学特性进行鉴定。结果表明:小鼠经免疫原免疫后,小鼠多抗血清效价均达到1∶128 000。选择敏感性较好的2号小鼠进行细胞融合,经多次亚克隆后,筛选出1G3、3H3两株杂交瘤细胞株,其中1G3所产SARA mAb效价较高,为1∶512 000,IC50为6.34 ng/mL,亲和常数为8.55×108L/mol,与诺氟沙星的交叉反应率为1.06%,与其他药物交叉反应率均低于0.50%。
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