【摘 要】
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目的 观察磷脂酰肌醇-3激酶(P13K)/AKT信号转导通路特异性抑制剂LY294002对人官颈癌细胞株(HeLa细胞)端粒酶活性的影响,同时观察其对细胞生物学行为的改变,探讨肿瘤细胞内端
【机 构】
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吉林大学病理生物学教育部重点实验室
【基金项目】
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教育部高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划;
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目的 观察磷脂酰肌醇-3激酶(P13K)/AKT信号转导通路特异性抑制剂LY294002对人官颈癌细胞株(HeLa细胞)端粒酶活性的影响,同时观察其对细胞生物学行为的改变,探讨肿瘤细胞内端粒酶活性可能的调节机制.方法 ccK.8法测定LY294002作用于HeLa细胞的Ic50值;Western blot检测总AKT以及磷酸化AKT(P-AKT);端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附测定法(TRAP-ELISA)测定细胞的端粒酶活性;生长曲线、流式细胞术和Hoechst33258染色分别检测细胞增殖、细胞周期和细胞的凋亡;最后用划痕实验检测细胞的迁移能力.结果 LY294002作用于HeLa细胞的Ic50值为1.73 mg/L;Western blot结果显示LY294002作用使细胞在总AKT蛋白表达相同的情况下明显抑制了P-AKT,此时细胞内端粒酶活性由对照组的98.61%显著降低至36.72%.LY294002降低了细胞内端粒酶活性同时,使细胞的生长增殖能力明显降低,处于Go/G.期(静止期)的细胞由对照组的47.36%增加到实验组的66.88%,凋亡细胞的比例则由2.4%增加至14.9%,同时细胞的运动迁移明显降低,迁移距离由对照组62.57%明显降低为24.6%.结论 LY294002抑制P13K/AKT信号转导通路能明显改变HeLa细胞内端粒酶活性,同时引起细胞生物学行为的改变,其细胞内端粒酶活性的调节可能与P13K/AKT信号转导通路密切相关.
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