人Puma启动子荧光素酶报告基因的构建和鉴定

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目的:克隆人Puma基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,并在细胞内检测其活性。方法:采用PCR技术,从人HepG2细胞中扩增出Puma启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,测序所扩增的DNA序列,并将其转染入H1299细胞中检测其活性。结果:测序结果表明,扩增的Puma启动子序列正确;双报告基因实验检测荧光素酶活力表明,构建的报告基因具有启动子活性。结论:Puma启动子的克隆及人Puma启动子报告基因的成功构建,为p53家族凋亡通路的功能研究提供了必要的实验材料。
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