植物乳杆菌ST-Ⅲ的β-果糖苷酶在大肠杆菌中的表达及优化

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为了了解植物乳杆菌利用低聚果糖的机理,以一株具有良好的利用低聚果糖能力的植物乳杆菌ST-Ⅲ基因组为模板,成功地扩增出β-果糖苷酶基因(sacA),基因片段长度为1506bp,编码501个氨基酸。将扩增出的目的片段克隆到pet28(a)(+)载体上,在大肠杆菌中进行表达,并优化了表达条件。IPTG浓度0.1mmol/L,诱导温度为16℃,诱导12h是该酶的最佳表达条件,比酶活为3.4U/mg;亲和层析纯化后,比酶活达到107.0U/mg。
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