猪源口蹄疫病毒China99／S株基因组全长cDNA的构建及其感染性鉴定

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lelefeng123

【摘要】

：

提取猪源FMDV China99／S组织样品总RNA，利用设计的引物对，分段进行扩增，获得覆盖全基因组的4个重叠片段（A、B、C和E），然后用BsmBI／XmaI、XmaI／BamHI、BarnHI／NotI、HpaI／Kpn1分别双酶切A

【作者】

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常艳燕郑海学靳野王光祥尚佑军刘湘涛

【机构】

：

中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,广东省农业科学院兽医研究所

【出处】

：

畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

：

口蹄疫病毒全长CDNA克隆 Poly(C) 反向遗传学 foot-and-mouth disease virus full-length cDNA clon

【基金项目】

：

国家科技支撑计划课题（2006BAD06A03）,国家高技术研究发展计划（2006AAIOA204）

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提取猪源FMDV China99／S组织样品总RNA，利用设计的引物对，分段进行扩增，获得覆盖全基因组的4个重叠片段（A、B、C和E），然后用BsmBI／XmaI、XmaI／BamHI、BarnHI／NotI、HpaI／Kpn1分别双酶切A、B、E、C，并纯化回收，依次定向克隆到带有聚合酶I的pP1cDNA3．1（＋）转录载体内，最终得到重组质粒pPI—FMDVcDNA3．1（＋）；然后对该质粒进行序列测定。结果表明，China99／S株基因组全基因组序列长8116nt（含Poly（C）和Poly（A）片

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