【摘 要】
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目的 探讨从转染IKK2dn并负载供者抗原的未成熟树突状细胞(imDC)诱导产生的调节性T细胞(Treg)中筛选CD4+ CD25 - Treg的方法,并进行鉴定.方法 Lewis大鼠骨髓源性imDC,转染IKK2dn后负载供者BN大鼠抗原,与Lewis大鼠T细胞进行体外混合淋巴细胞反应(MLR)诱导产生Treg,用免疫磁珠法(MACS)筛选出CD4+ CD25 -T细胞,流式细胞仪(FCM)检测
【机 构】
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215028苏州,上海交通大学医学院苏州九龙医院泌尿外科,苏州大学附属第一医院泌尿外科,苏州大学附属第一医院泌尿外科,苏州大学附属第一医院泌尿外科,苏州大学附属第一医院泌尿外科,苏州大学附属第一医院泌
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目的 探讨从转染IKK2dn并负载供者抗原的未成熟树突状细胞(imDC)诱导产生的调节性T细胞(Treg)中筛选CD4+ CD25 - Treg的方法,并进行鉴定.方法 Lewis大鼠骨髓源性imDC,转染IKK2dn后负载供者BN大鼠抗原,与Lewis大鼠T细胞进行体外混合淋巴细胞反应(MLR)诱导产生Treg,用免疫磁珠法(MACS)筛选出CD4+ CD25 -T细胞,流式细胞仪(FCM)检测细胞纯度.加入CD4+ CD25 -T细胞行再次MLR检测其抑制T细胞增殖的作用.结果 经MACS筛选,CD4+ CD25 -T细胞纯度为(95.78±1.25)％.再次MLR结果显示CD4+ CD25 -T细胞组的吸光度值为(0.106±0.006),低于BN抗原组(0.189±0.007)、Adv0-CD4+T细胞组(0.419±0.014)及第三方供者抗原组(0.200±0.008),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 转染IKK2dn并负载抗原的imDC诱导产生的Treg,经MACS筛选可以获得高纯度的CD4+CD25-T细胞,对同种T细胞增殖具有针对供者的特异性免疫抑制作用。
其他文献
目的 探讨肾细胞癌、癌旁肾组织中LGL( lethal giant larvae)/Hugl-1基因的表达水平及临床意义.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR法)方法检测肾细胞癌组织及癌旁组织各30例中LGL/Hugl-1基因的表达,同时应用统计学方法评价在肾细胞癌不同临床阶段LGL/Hugl-1基因表达的差异.结果 LGL/Hugl-1在肾细胞癌组织中平均表达(LGL/
环氧合酶(COX)是花生四烯酸代谢中环氧合酶途径的限速酶,其同工酶COX-2在结直肠癌中高表达[1],与肿瘤的生存、预后有关.前期体外实验发现利用RNA干扰(RNAi)对结肠癌细胞产生了独特的生物学效应[2].我们建立人结肠癌皮下荷瘤鼠模型,探讨其对肿瘤生长及血管生成的影响。
骨髓间充质干细胞(BMSCs)是来源于中胚层的具有高度复制和分化潜能的种子细胞,BMSCs可以分化为脂肪细胞,传统的方法是用胰岛素、地塞米松、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、吲哚美辛中的一种或者联合诱导,但是上述试剂都为化学试剂,因此临床上应用安全性低.我们应用脂肪上清诱导BMSCs分化为脂肪细胞,为BMSCs分化为脂肪细胞提供一种比较简便安全的方法。
胃黏膜上皮异型增生(GED)作为胃癌癌前病变,已经得到医学界的广泛重视.Correa等[1]研究结果表明,胃癌的发生是由一系列的组织学事件组成:慢性浅表性胃炎-萎缩性胃炎-肠化-GED-浸润性胃癌;发现GED形成和恶变的机制,预测GED恶变的发生并在早期对患者进行干预是当前研究的热点和难点。
目的 观察环孢素预处理在同种带瓣管道移植的作用.方法 将1个月龄的中国白兔50只(取其带瓣主动脉)作为供体,体质量0.25 ～0.35 kg;将成年中国白兔50只,体质量2.50～3.50 kg,随机分2组作为受体,25只(移植时供体带瓣主动脉接受环孢素预处理)为实验组,25只(移植时供体带瓣主动脉不接受环孢素预处理)为对照组,移植前后应用葡萄糖代谢法检测带瓣血管的代谢,分别于第2、4周取出移植主
125 I粒子植入治疗目前在国内外已广泛应用于实体肿瘤综合治疗[1].在对实体恶性肿瘤治疗过程中,选用何种活度的125I粒子对不同部位、组织学类型、分化程度的肿瘤细胞进行杀伤,以及他们各自的并发症如何均是临床应用中亟待解决的问题.从国内外相关报道了解到,对于不同部位、组织学类型、分化程度的恶性肿瘤在125I粒子活度的选择上存在差异,且国内较国外应用粒子活度偏高.现介绍国内外应用125I粒子活度对实
胃肠道间质肿瘤(GIST)是位于胃肠道或腹腔内的表达KIT(CD117)蛋白的间叶源性肿瘤,大多数存在KIT和血小板源性生长因子受体α-多肽(PDGFRA)基因的突变[1].伊马替尼(Imatinib)是一种口服的ATP的竞争性抑制剂,能竞争性地结合于KIT酪氨酸激酶功能区的ATP结合位点,从而阻断了失控的信号传导通路,因此目前已成为治疗GIST的标准药物.然而一般在Imatinib平均治疗24个
目的 观察罗非鱼胰岛腹腔内移植对糖尿病小鼠的治疗作用.方法 胶原酶消化分离罗非鱼胰岛.链脲霉素小鼠腹腔内注射,建立药物性糖尿病小鼠模型.消化分离罗非鱼胰岛后,移植入糖尿病小鼠腹腔内,即胰岛移植组(n=14只,简称胰岛组)；设立生理盐水注射(n=10只,简称盐水组)为对照组.比较移植后两组糖尿病小鼠的存活率；动态观察小鼠血糖的变化.并对移植物进行病理检查和免疫组织化学检测.结果 移植后1d胰岛组糖尿
肝硬化是肝癌发生最主要的危险因素,每年有2％～6％的肝硬化患者发展为肝癌[1],新近研究结果显示,miRNA-21(miR-21)在人类肝细胞癌中呈高表达状态,并可促进肝癌细胞增殖及远处转移[2].本实验旨在观察miR-21是否在肝硬化阶段就呈现表达失控状态,促进肝脏纤维化,甚至诱发肝细胞癌变。
目的 探讨用气动隔膜泵施行搏动体外循环的可行性,并观察该装置对犬肝肾功能的影响.方法 利用气动驱动装置、气动隔膜泵、膜肺及体外循环管道建立搏动体外循环回路,连续运转3d后检测搏动体外循环装置的稳定性及测定相关参数；并将20条成年健康杂种犬随机分为实验组(n=10)和对照组(n=l0),实验组施行气动隔膜泵搏动体外循环,对照组施行滚压泵平流体外循环,连续转机6h,比较两组犬肝、肾功能及细胞结构变化.