【摘 要】
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目的探讨线粒体及其细胞色素C释放,在过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡信号途径中的作用.方法人脐静脉内皮细胞和100 μmol/L H2O2共同培养24 h,或内皮细胞先与环孢霉素A(
【机 构】
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第三军医大学西南医院全军烧伤研究所
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目的探讨线粒体及其细胞色素C释放,在过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡信号途径中的作用.方法人脐静脉内皮细胞和100 μmol/L H2O2共同培养24 h,或内皮细胞先与环孢霉素A(cyclosporin A,CsA)孵育30 min后加入H2O2;在不同时相点取细胞作DAPI染色计数凋亡细胞数量;同时用Rhoadmine123聚集法观察线粒体通透性的变化;Western bolt检测早期线粒体和血浆中细胞色素C浓度的变化.结果 H2O2处理细胞后,细胞呈现出典型的凋亡形态:细胞皱缩,胞核致密,凋亡小体形成.从处理后4 h起凋亡细胞数量迅速增加,至12 h达峰值.CsA可以明显抑制H2O2诱导内皮细胞凋亡的作用.H2O2可诱导线粒体细胞色素C浓度的下降,使得胞浆中细胞色素C浓度升高;同样线粒体中Rhoadmine123浓度下降,线粒体通透性增加,而CsA则可以明显抑制二者的变化.结论 H2O2促进细胞色素C释放进入胞浆,导致内皮细胞的凋亡.CsA抑制凋亡的机制是通过保护线粒体膜的正常功能来实现的.
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