【摘 要】
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为探究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和大肠杆菌鞭毛蛋白(FliC)对口蹄疫(FMD)灭活疫苗免疫效果的影响,通过大肠杆菌表达系统成功表达了重组猪GM-CSF蛋白和重组FliC蛋白,之后进行了重组蛋白的纯化与复性。将制备好的重组蛋白与口蹄疫灭活疫苗混合后免疫小鼠,免疫后第4、7、10、14天采集小鼠血清,用间接ELISA检测VP1结构蛋白抗体水平,第14天无菌分离小鼠脾用qPCR检测脾
【基金项目】
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河北省现代农业产业技术体系羊产业创新团队专项(HBCT2018140204); 河北农业大学精准畜牧学科群建设项目(1090064); 河北省自然科学基金重点项目(C2019204219);
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为探究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和大肠杆菌鞭毛蛋白(FliC)对口蹄疫(FMD)灭活疫苗免疫效果的影响,通过大肠杆菌表达系统成功表达了重组猪GM-CSF蛋白和重组FliC蛋白,之后进行了重组蛋白的纯化与复性。将制备好的重组蛋白与口蹄疫灭活疫苗混合后免疫小鼠,免疫后第4、7、10、14天采集小鼠血清,用间接ELISA检测VP1结构蛋白抗体水平,第14天无菌分离小鼠脾用qPCR检测脾细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的相对表达量。ELISA检测结果表明,免疫后第7、10、14天,GM-CSF佐剂组和FliC佐剂组的抗体水平明显高于FMD疫苗组,复合佐剂的抗体水平高于FMD疫苗组和其他佐剂组。q PCR结果显示,GM-CSF佐剂组、FliC佐剂组与复合佐剂组中IL-2、IL-4、IL-10的相对表达量显著高于疫苗组和PBS组。由此可见,重组FliC蛋白和重组猪GM-CSF蛋白可以提高FMD灭活疫苗的免疫应答水平,且重组蛋白联合使用的效果更佳。
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