清肺通络方对肺炎支原体诱导A549细胞氧化应激损伤的影响及作用机制研究

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目的 探讨清肺通络方对肺炎支原体(MP)感染人类肺泡基底上皮细胞(A549 细胞)后氧化应激损伤的影响及其可能的机制。方法 取 A549 细胞分为空白组、MP 感染组(MP 浓度为 1×10~7CFU·mL-1)、不同浓度清肺通络方组(清肺通络方浓度分别为 0.5 mg·L-1、1.0 mg·L-1、2.0 mg·L-1),于清肺通络方处理 3 d 时,以倒置显微镜观察各组细胞形态学改变,2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光染色法检测不同组细胞内活性氧(ROS)含量,Western blot 检测核转录因子 E2相关因子 2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、胞浆伴侣分子(Keap1)、醌氧化还原酶(NQO1)表达水平。取 A549细胞分为空白组、MP感染组、MP+siNC 组、MP+清肺通络方组、MP+siNrf2组、MP+siNrf2+清肺通络方组,于清肺通络方处理 3 d时进行细胞转染,Western blot检测 Nrf2、Keap1、HO-1、NOQ1表达水平。结果 适宜浓度的清肺通络方可上调MP感染后 A549细胞内Nrf2、Keap1、HO-1和 NOQ1 蛋白表达,降低细胞内 ROS 水平,从而抑制细胞凋亡。抑制 Nrf2 表达后,清肺通络方的抗氧化效应降低。结论 清肺通络方可减轻MP感染后A549细胞氧化损伤,其机制可能与调控 Nrf2/抗氧化响应元件(ARE)信号通路有关。
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