【摘 要】
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目的:探究缺氧条件下,结直肠癌细胞外泌体对巨噬细胞极化的影响及机制.方法:差速离心法提取正常条件下和缺氧条件下结直肠癌细胞HT-29所分泌的外泌体(HT-29 N-exo和HT-29 H-exo),透射电镜和Western blot鉴定外泌体,荧光显微镜下观察外泌体的摄取.将U937细胞与100 ng/mL的PMA共孵育的同时分别与1μg/mL的HT-29 N-exo和HT-29 H-exo以及等体积的PBS共孵育,记为PBS组、HT-29 N-exo组、HT-29 H-exo组.qRT-PCR检测各组细
【机 构】
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保定市第一医院结直肠外科,河北 保定 071000;保定市第一医院防保科,河北 保定 071000
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目的:探究缺氧条件下,结直肠癌细胞外泌体对巨噬细胞极化的影响及机制.方法:差速离心法提取正常条件下和缺氧条件下结直肠癌细胞HT-29所分泌的外泌体(HT-29 N-exo和HT-29 H-exo),透射电镜和Western blot鉴定外泌体,荧光显微镜下观察外泌体的摄取.将U937细胞与100 ng/mL的PMA共孵育的同时分别与1μg/mL的HT-29 N-exo和HT-29 H-exo以及等体积的PBS共孵育,记为PBS组、HT-29 N-exo组、HT-29 H-exo组.qRT-PCR检测各组细胞CD163、IL-10、IL-1Rα、TGF-β1、CCL2、TNF-αmRNA的表达,Elisa检测各组细胞IL-10和TNF-α 分泌,流式细胞术鉴定各组细胞CD163和CD11b表达,Western blot检测各组细胞PTEN/PI3Kγ信号通路激活情况.结果:差速离心法所提取的外泌体符合其结构和生物学特征,并且可被U937细胞摄取;相比于HT-29 N-exo组,HT-29 H-exo组细胞CD163、IL-10、IL-1Rα、TGF-β1、CCL2表达显著增加(P<0.05),IL-10分泌显著增加,TNF-α 表达以及分泌显著减少(P<0.01),CD163+CD11b+巨噬细胞数显著增加(P<0.001),PTEN/PI3Kγ信号通路显著激活(P<0.001).结论:缺氧条件下结直肠癌细胞外泌体能够显著促进巨噬细胞M2型极化,其机制为激活PTEN/PI3Kγ信号通路.
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目的:探究胃癌细胞外泌体调控M2型巨噬细胞极化及对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:差速离心法提取胃黏膜上皮细胞GES-1和胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901外泌体,透射电镜和Western blot鉴定外泌体,将U937细胞与PMA共孵育诱导U937细胞分化为巨噬细胞的同时分别与PBS、GES-1 exo、MGC-803 exo、SGC-7901 exo、IL-4孵育48 h,流式细胞术检测孵育后各组细胞CD206和HLA-DR表达,qRT-PCR检测CCL17、CXCL8、IL-10、TGF
为了满足病人和同事的期望和需求,眼科护士每天不得不应付不同的任务,尤其是在繁忙的教学医院工作时.rn所以,我们怎么去定义眼科护士?rn眼科护士在全球诸多眼健康服务中皆扮演了重要角色,这其中包括促进眼健康,预防疾病,诊断与治疗以及视力低下的康复服务.在缺乏眼科医生的国家,眼科护士通常还肩负起诊断和治疗病人的职责,并且在必要和条件允许时将他们转诊.
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目的:研究乳腺癌细胞中转录调节因子c-Myb的表达对肺转移的影响及其分子机制.方法:构建c-Myb高表达的4T1乳腺癌细胞株,种植小鼠构建乳腺癌动物模型,检测实验动物肺转移情况,通过荷瘤抑制试验检测肺转移抑制效果.提取组织进行荧光PCR检测相关炎症因子的表达.利用Medisapiens数据库的生物信息学资源,对c-Myb和Ccl2的表达与乳腺癌患者的预后进行分析.结果:高表达c-Myb的荷瘤小鼠肺部转移灶明显减少,其中炎症相关因子表达受限.由数据库分析得出,c-Myb高表达患者生存期得以延长.结论:乳腺癌
目的探讨乳腺癌患者血清三叶因子1(TFF1)、人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)和金属硫蛋白1E(MT1E)水平与患者生存期的关系。方法选取接受乳腺手术的132例患者,均经病理诊断,根据疾病诊断分为乳腺癌组(n=78)和乳腺良性病变组(n=54),另选取同期在体检中心体检的60名年龄相匹配的健康女性作为健康对照组。检测并比较所有入选研究对象的住院未治疗前的血清TFF1、UBE2C、MT1E水平,采用Kaplan-Merier生存分析法和Cox比例风险回归分析乳腺癌患者血清TFF1、UBE2C和MT1E水平
目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)lnc01317和lnc00886在胃癌患者组织和血液中的表达及其生物信息学分析.方法:通过TCGA数据库筛选在胃癌中差异表达的lncRNA,进一步使用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)在新鲜胃癌组织中验证TCGA数据库筛选的lncRNA.最后挑选在胃癌组织验证中差异显著的lncRNA在胃癌患者和健康人血液中验证lncRNA的表达,ROC曲线分析其诊断的可能性.结果:在TCGA数据库中筛选及9对胃癌及癌旁组织验证发现lnc01317和lnc00886在胃癌组
目的:探讨三结构域蛋白59(tripartite-motif protein 59,TRIM59)对于人肝细胞肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)细胞增殖与迁移的影响以及波形蛋白(vimentin,VIM)作为其中潜在调控靶点的相关性研究.方法:通过细胞培养和细胞转染得到所需要的人HCC细胞,采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测其中TRIM59 mRNA的表达水平并通过蛋白印迹法(Western blot)检测TRIM59蛋白质的表达水平;采用慢病毒介导的基因沉默效
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目的:探讨以上皮细胞黏附分子(EpCAM)为标志物的荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测小细胞肺癌(SCLC)外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的临床意义.方法:通过前瞻性随访研究,用qRT-PCR对50例初治SCLC患者外周血中EpCAM信使核糖核酸(mRNA)表达水平及拷贝数进行检测,来评价SCLC患者外周血中EpCAM+-CTCs的拷贝数及变化与临床特征及预后之间的关系.结果:50例患者治疗前EpCAM+-CTCs的拷贝数为130.89～10971.43 copies/μL.治疗前不同临床病理