【摘 要】
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采用正交和单因素试验设计方法,研究Mg2＋、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA、退火温度及循环次数对ISSR-PCR扩增效果的影响,建立块根紫金牛ISSR-PCR反应体系和扩增程序,即2
【机 构】
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广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西师范大学生命科学院
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采用正交和单因素试验设计方法,研究Mg2＋、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA、退火温度及循环次数对ISSR-PCR扩增效果的影响,建立块根紫金牛ISSR-PCR反应体系和扩增程序,即25 ul的体系中含Mg2＋2.0 mmol/L,dNTP 0.15mmol/L,引物1.0μmol/L,TaqDNA聚合酶1.0 U,模板DNA 50ng,10×Buffer 2.5μl。适宜的扩增程序是94℃预变性5 min,94℃变性30 s,56.6℃退火45 s,70℃延伸2.0 min;45
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