对虾抗菌肽PEN-3和PEN-4嵌合基因在大肠杆菌中的表达及抗菌活性测定

来源 :食品与药品 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yjcwo

【摘要】

：

目的表达融合2种具有对虾抗菌肽活性的新型抗菌肽。方法利用overlap-PCR连接并扩增对虾抗菌肽Penaeidin-3和Penaeidin-4的嵌合基因序列,定向插入原核表达载体pET-28a（＋）中,构建

【作者】

：

郝淼闻范立强刘一赵健李素霞袁勤生

【机构】

：

华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室

【出处】

：

食品与药品

【发表日期】

：

2009年5期

【关键词】

：

对虾抗菌肽重叠PCR 嵌合基因大肠杆菌蛋白质表达 penaeidin overlap-PCR chimeric gene E. coli protein

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目的表达融合2种具有对虾抗菌肽活性的新型抗菌肽。方法利用overlap-PCR连接并扩增对虾抗菌肽Penaeidin-3和Penaeidin-4的嵌合基因序列,定向插入原核表达载体pET-28a（＋）中,构建此嵌合基因的表达质粒。将表达质粒转化至E.coliBL21（DE3）,经终浓度1.0mmol/LIPTG分别在37℃和15℃诱导表达4h和14h,SDS-PAGE分析嵌合蛋白质的表达,用抑菌圈法测定产物的抑菌活性。结果获得了含有Penaeidin-3和Penaeidin-4嵌合基因的表达质粒;18%S

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