293T细胞中SQSTM1/p62-GFP的表达及其与LC3在诱导自噬状态下的定位分布

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：maliuzhu

【摘要】

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为探究SQSTM1/p62蛋白在细胞发生自噬时的定位,以人肺腺癌A549细胞的cDNA为模板,PCR扩增SQSTM1基因(编码p62蛋白)并将其插入pEGFP-N1真核表达质粒。将重组质粒转染进入人胚肾293T细胞中表达p62绿色荧光融合蛋白(GFP-p62),利用Earle’s盐平衡溶液饥饿诱导细胞自噬,Western blotting和激光共聚焦显微镜检测GFP-p62的表达及其与自噬相关蛋白LC3在自噬细胞中的定位。结果发现,重组载体pEGFP-N1-p62转染293T细胞后,293T细胞能高效表达

【作者】

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游金杨光铭徐丽明罗达卢春花

【机构】

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广西大学生命科学与技术学院,广西大学医学院

【出处】

：

基因组学与应用生物学

【发表日期】

：

2021年1期

【关键词】

：

p62/SQSTM1 LC3 293T 细胞自噬

【基金项目】

：

国家自然科学基金(81360324,81760500),广西自然科学基金(2017GXNSFAA198362,2018GXNSFDA0500-09),广东省普通高校功能蛋白质研究暨南大学重点实验室开放课题(2012001)共同资助。

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