白癜风患者血清自身抗体IgG识别人黑素浓集素受体-1 B细胞表位的研究

来源 :中华皮肤科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jing4912
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目的 寻找白癜风患者血清中抗体识别的人黑素浓集素受体-1(MCHR1)B细胞表位肽段.方法从重组质粒pcDNA3/MCHR1中PCR扩增包含预测抗原表位MCHR1肽段的基因,构建重组表达载体pGEX-4T/MCHR1,经限制性内切酶双酶切及DNA测序鉴定,转化大肠杆菌DH5α,利用谷胱甘肽巯基转移酶(GST)纯化试剂盒纯化表达的融合蛋白.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定所表达的蛋白是否具有白癜风患者血清识别的表位.结果选择表达最可能包含B细胞表位的MCHR1氨基酸1~94(aa1~94),构建表达载体pGEX4T/MCHR1,得到纯化的重组蛋白GST-MCHR1相对分子质量为37 000.ELISA法检测结果显示,13.2%的白癜风患者血清抗MCHR1自身抗体IgG呈阳性反应.结论MCHR1aa1~94包含了白癜风患者自身抗体IgG识别的B细胞表位,为研究白癜风的发病机制奠定基础。

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