【摘 要】
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目的 利用稳定表达乙型肝炎病毒X(hepatitis B virus X,HBx)的小鼠模型探讨HBx在致癌过程中COX-2以及下游因子的动态变化过程及其作用.方法 利用Western blot、RT-qPCR检测HB
【机 构】
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400016重庆,重庆医科大学药学院,重庆市生化与分子药理学重点实验室;400016重庆,重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心
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目的 利用稳定表达乙型肝炎病毒X(hepatitis B virus X,HBx)的小鼠模型探讨HBx在致癌过程中COX-2以及下游因子的动态变化过程及其作用.方法 利用Western blot、RT-qPCR检测HBx-EGFP-14-19细胞中HBx的表达;通过向昆明(KM)小鼠肝门静脉注射HBx-EGFP-14-19细胞建立可长期稳定表达HBx的动物模型,分别在30、90、180和360 d处死小鼠;利用Western blot,RT-qPCR及免疫组化的方法检测HBx在肝脏中的表达,HE染色观察肝组织病理特征;Western blot,RT-qPCR检测肝组织中COX-2及其下游因子、细胞周期、凋亡相关因子mRNA和蛋白表达水平.结果 成功构建了可长期稳定表达HBx的动物模型并最终发展为肝癌;HBx转入小鼠体内90 d后COX-2及其下游因子VEGF的蛋白质和mRNA表达水平被持续上调直至肿瘤发生(P＜0.05);小鼠转入HBx后肝脏促凋亡因子Bad、Bax的蛋白质和mRNA表达水平降低(P＜0.05),抗凋亡因子Bcl-2的mRNA和蛋白水平升高(P＜0.05);细胞周期因子CyclinD1、CDK4的mRNA和蛋白质表达水平升高(P＜0.05);给予HBx组小鼠COX-2抑制剂塞来昔布后可逆转HBx对上述基因的作用.结论 HBx可导致肝癌发生,其机制可能与上调COX-2及其下游因子有关.
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