【摘 要】
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目的研究沙棘花青素提取物（TheanthocyanidinextractofHippophaerhamnoidesL.，HRAE）对双氧水诱导H1299细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法利用双氧水诱导H1299细胞氧化损伤模型，采用MTT法检测HRAE对细胞活力的影响，采用荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧（ReactiveOxygenSpecies，ROS）的含量；采用试剂盒分别测定超氧化
【基金项目】
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山东省重大科技创新工程项目（2021CXGC010508）；
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目的研究沙棘花青素提取物（TheanthocyanidinextractofHippophaerhamnoidesL.，HRAE）对双氧水诱导H1299细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法利用双氧水诱导H1299细胞氧化损伤模型，采用MTT法检测HRAE对细胞活力的影响，采用荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧（ReactiveOxygenSpecies，ROS）的含量；采用试剂盒分别测定超氧化物歧化酶（Superoxidedismutase，SOD）、过氧化氢酶（Catalase，CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathionperoxidase，GSH-Px）及丙二醛（Malondialdehyde，MDA）的含量；采用Westernblot法检测血红素氧合酶-1（hemeoxygenase-1， HO-1）、醌氧化还原酶-1（NAD（P）Hquinineoxidoreductase1，NQO1）、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（KelchlikeECH-associatedprotein1，Keap1）和核转录因子E2相关因子（nuclearfactorE2-relatedfactor2，Nrf2）的蛋白质水平；采用相关数据库和软件对沙棘花青素提取物的关键活性成分表儿茶素和儿茶素与氧化应激关键靶点蛋白Nrf2进行分子对接验证。结果MTT实验表明，在0～800μg/mL浓度范围内HRAE对细胞活力无显著性抑制作用（P＞0.05）；与模型组相比，给药组中MDA水平下降，SOD、CAT和GSH-Px等活性均有不同程度升高（P＜0.05或P＜0.01）；与模型组相比，给药组ROS的含量显著降低（P＜0.05）；Western blot显示HRAE可显著调节HO-1、NQO1、KEAP和Nrf2的蛋白质水平（P＜0.05）；分子对接结果表明表儿茶素和儿茶素与氧化应激关键蛋白Nrf2具有良好的自由结合活性。结论沙棘花青素提取物以浓度依赖降低双氧水导致的H1299细胞氧化损伤，其机制可能与促进Nrf2/HO-1信号通路的激活有关。
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