【摘 要】
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目的:探讨脂氧素A4（Lipoxin A4,LXA4）对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护作用及机制。方法:体外传代培养MLE-12细胞,随机分为:空气组、高氧组、高氧+LXA4组、高氧+转化生长
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院儿科; 江苏大学附属医院儿科;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助(81300521,81270821,81370746)
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目的:探讨脂氧素A4（Lipoxin A4,LXA4）对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护作用及机制。方法:体外传代培养MLE-12细胞,随机分为:空气组、高氧组、高氧+LXA4组、高氧+转化生长因了（TGF）-β1中和抗体组、高氧+LXA4+TGF-β1中和抗体组。倒置相差显微镜下观察各组MLE-12形态学变化;实时荧光定量PCR（q RT-PCR）法检测Ⅰ型胶原（collagenⅠ）、肌腱蛋白C（tenascin-C）、TGF-βR1、TGF-βR2和Smad3的m RNA水平。Western blot检测TGF-β1/Smads信号（TGF-βR1、Smad2、Smad3、Smad4、p-Smad2和p-Smad3）蛋白表达。结果:（1）细胞形态:高氧组MLE-12明显失去原有正常细胞形态,细胞变圆,核固缩;药物干预组正常细胞数增多,大部分细胞形态与正常细胞形态基本相似;（2）细胞外基质（extracellular matrix,ECM）m RNA表达:LXA4和TGF-β1中和抗体能抑制高氧介导的collagenⅠ和tenascin-C m RNA的表达量升高（P<0.05）,其中高氧+LXA4+TGF-β1中和抗体组作用最为显著（P<0.05）;（3）TGF-β1/Smads信号m RNA和蛋白含量:LXA4和TGF-β1中和抗体能抑制高氧介导的TGF-βR1、TGF-βR2和Smad3的m RNA水平以及下调TGF-β1/Smads信号相关蛋白的表达量（P<0.05）,其中高氧+LXA4+TGF-β1中和抗体组细胞的表达量下调最为显著（P<0.05）。结论:LXA4对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护可能与调控TGF-β1/Smads信号以及collagenⅠ和tenascin-C的表达有关。
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