【摘 要】
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目的 建立检测细胞内三磷酸腺苷 (ATP) 含量的生物发光方法, 并利用该方法检测红细胞和不同再灌注处理心肌细胞内ATP的含量。方法 制备所需测定的细胞ATP提取液, 采用荧光
【机 构】
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华中科技大学同济医学院公共卫生学院环境医学研究所,华中科技大学同济医学院附属协和医院心外科
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目的 建立检测细胞内三磷酸腺苷 (ATP) 含量的生物发光方法, 并利用该方法检测红细胞和不同再灌注处理心肌细胞内ATP的含量。方法 制备所需测定的细胞ATP提取液, 采用荧光素 荧光素酶检测系统检测 ATP含量, ATP的含量与系统中所发射的光子数成正比, 发光强度越大, ATP含量越高, 通过检测发光强度计算ATP的含量。结果 通过对红细胞内ATP含量的测定, 确定了测定细胞内ATP的最佳反应条件: pH=7 .8, 温度 20~25 ℃,荧光素酶浓度3. 0 mg/ml 。利用确定的最佳条件对各种不同处理的心肌细胞内ATP浓度进行了检测, ATP检测结果与心肌功能的实验观察结果符合。结论 生物发光方法测定 ATP含量方法简单、结果可靠, 可以在短时间内得到检测结果, 是一种检测细胞内ATP的有效方法。
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