内质网应激介导过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡

来源 :华中科技大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:jeffyi2009
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的探讨氧化应激诱导心肌细胞凋亡是否与内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的调控机制有关。方法给予乳鼠心肌细胞高低两种浓度(500、100μmol/L)和不同时间(0、4、8、12、24h)过氧化氢(H2O2)刺激。采用流式细胞仪检测各组心肌细胞的凋亡率;苏木精-伊红染色法(HE)观察心肌细胞凋亡的典型形态;通过Western blot检测ERS标志蛋白p-PERK和CHOP的表达变化。进一步采用ERS抑制剂化学伴侣PBA(4-phenylbutyric acid)抑制心肌细胞ERS,Western blot检测p-JNK、p-PERK和CHOP蛋白的表达变化;采用流式细胞仪检测Caspase-12和Caspase-3的活性。结果①低浓度H2O2可显著诱导心肌细胞凋亡,高浓度H2O2则导致心肌细胞发生坏死;100μmol/L H2O2刺激心肌细胞8h时其凋亡率最高。②心肌细胞发生凋亡时ERS标志蛋白p-PERK和CHOP表达显著增高。③ERS抑制剂PBA预处理心肌细胞,可有效抑制H2O2诱导的p-PERK、CHOP表达及Caspase-3、Caspase-12活性的上调,与单纯H2O2处理组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论低浓度H2O2可通过促发ERS整合调控机制介导心肌细胞凋亡。这一结果将从ERS整合调控细胞应激的角度为心血管疾病的防治提供新思路。 Objective To investigate whether oxidative stress-induced cardiomyocyte apoptosis is associated with the regulation of endoplasmic reticulum stress (ERS). Methods Cardiomyocytes were exposed to H2O2 at different concentrations (500, 100μmol / L) and different time (0, 4, 8, 12, 24h). The apoptotic rate of cardiomyocytes in each group was detected by flow cytometry. The typical morphology of cardiomyocyte apoptosis was observed by hematoxylin-eosin staining (HE staining). The expressions of p-PERK and CHOP in ERS were detected by Western blot . The ERS inhibitor PBA (4-phenylbutyric acid) was further used to inhibit the ERS expression in cardiomyocytes, and the expressions of p-JNK, p-PERK and CHOP were detected by Western blot. The expressions of Caspase-12 and caspase-3 were detected by flow cytometry active. Results ① Low concentration of H2O2 significantly induced cardiomyocyte apoptosis, and high concentration of H2O2 resulted in necrosis of cardiomyocytes. The apoptosis rate of cardiomyocytes was the highest when stimulated with 100μmol / L H2O2 for 8h. ② The apoptosis of cardiomyocytes ERS marker protein p-PERK and CHOP expression was significantly increased. ③ Pretreatment with cardioprotective agents PBA could effectively inhibit the H2O2-induced p-PERK and CHOP expression and the up-regulation of Caspase-3 and Caspase-12 activity, as compared with H2O2 alone group (P <0.01) . Conclusions Low concentration H2O2 can induce cardiomyocyte apoptosis by inducing ERS integration and regulation. This result will provide new ideas for the prevention and treatment of cardiovascular diseases from the perspective of ERS integration and regulation of cell stress.
其他文献
长期水文影响评价模型(Long-term Hydrological Impact Assessment,L-THIA)是研究人类活动对流域非点源影响的重要评价模型之一。本文深入阐明了L-THIA模型的原理,探讨了SCS CN方法和污染物负荷的具体计算方法。在此基础上,提出了L-THIA模型存在的不足和改进方向,并以ArcMap为平台,对该模型进行了二次开发,二次开发后的模型主要包括六个模块,分别为
体育礼仪在高校体育课中没有得到重视,在校园环境和社团活动中可有可无,在体育教育者的思想与知识结构中也仅为上课的官方形式。主要表现在教师对课堂体育礼仪的轻视及学生对
目的 探讨“递进式”护理模式与传统“说教式”工作模式在临床降糖药物试验中的应用效果是否存在差异,为临床药物观察研究提供有效的护理模式.方法 选取88例临床降糖药物试验
为了解长江野生暗纹东方纯群体遗传多样性现状,采用已发表的16对红鳍东方鲀微卫星引物对暗纹东方鲀基因组DNA进行PCR扩增,结果有10对微卫星引物(占总数62.5%)能扩增出特异性条
通过对安化柑橘产业发展的基础优势和制约产业发展瓶颈两方面的剖析,提出了从基地建设、科技提质、品牌营销等三大方面增强产业发展的“造血功能”、“输血功能”和“活血功
碱性亮氨酸拉链(basic region/leucine zipper motif,bZIP)类转录因子是研究最多的转录因子基因家族之一,在所有的真核生物中都存在含有bZIP结构域的蛋白,且在已经测序完成的
目的 研究反式激活蛋白(TAT)蛋白转导结构域介导的融合蛋白的跨膜转运,以及氧依赖性降解(ODD)结构域介导融合蛋白在体内外不同氧分压环境中的降解作用.方法 将TAT,ODD以及增
多溴联苯醚( PBDEs)广泛用于电子电器设备、自动控制设备、建筑材料和纺织品等商品化产品中.作为工业阻燃剂,它是一类环境中广泛存在的全球性有机污染物.由于其结构稳定,难以
采用盆栽试验,研究了干旱区绿洲土壤Cd/Pb复合胁迫下重金属在油菜中的分布、富集及迁移规律.结果表明:较低水平的Cd/Pb复合胁迫水平(w(Cd) <1.40×10-6,w(Pb)<300×10-6)对油菜
目的 探讨不同周龄小鼠肝脏组蛋白H3K9甲基转移酶(KMT)和去甲基化酶(KDM)的表达.方法 取2周、4周和6周龄BALB/c雄性小鼠肝脏组织,分别提取总mRNA和蛋白质,应用实时定量反转录