论文部分内容阅读
目的高良姜素是一种具有抗肿瘤活性的天然黄酮类化合物,SIRT1是参与许多生理过程的Sirtuin家族蛋白重要成员之一。文中旨在探讨SIRT1在高良姜素诱导Hep G2细胞凋亡过程中的作用。方法实验设置DMSO溶剂对照组、EX-527组(50μmol/L EX-527处理细胞2h)、高良姜素组(高良姜素处理细胞24h)和EX-527+高良姜素组(先用50μmol/L EX-527处理细胞2 h再用高良姜素处理细胞24 h)。用Hochest33342染色法和流式细胞术、Western blot分析细胞凋亡的变化。RNA干扰和转染外源基因调控SIRT1的表达后,130μmol/L高良姜素处理细胞24 h,并设置未感染腺病毒组、载体对照组(感染空载体腺病毒)、SIRT1敲降组(感染敲降SIRT1腺病毒)、未转染质粒组、空载体对照组(转染空载体质粒组)、SIRT1上调组(转染过表达SIRT1质粒),用流式细胞术和Western blot检测细胞凋亡。结果与DMSO溶剂对照组细胞凋亡率、PARP1剪切带与GAPDH灰度比值[(2.49±0.22)%,0.06±0.00]比较,高良姜素组[(11.62±0.55)%,0.89±0.01]、EX-527+高良姜素组[(25.75±0.61)%,1.15±0.06]均升高(P<0.01);其中EX-527+高良姜素组较高良姜素组亦明显升高(P<0.01)。Western blot结果表明,SIRT1敲降组中SIRT1与GAPDH灰度比值(0.06±0.01)较载体对照组(1.11±0.05)和未感染腺病毒组(1.10±0.04)明显减小(P<0.01)。与载体对照组和未感染腺病毒组比较,SIRT1敲降组细胞凋亡率、PARP1剪切带与GAPDH灰度比值均增加(P<0.01)。SIRT1上调组中SIRT1与GAPDH灰度比值(1.63±0.04)较载体对照组(0.89±0.02)和未转染质粒组(0.87±0.03)相比明显增大(P<0.01)。与未转染质粒组和空载体对照组比较,SIRT1上调组细胞凋亡率和SIRT1剪切带与GAPDH灰度比值降低(P<0.01)。结论 SIRT1抑制高良姜素诱导的Hep G2细胞凋亡。