基因工程α—半乳糖苷酶的制备及其性质研究

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sudyhard
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在获得可分泌表达α-半乳糖苷酶基因工程毕赤酵母菌株的基础上,尝试了基因工程α-半乳糖苷酶在5 L发酵罐中的表达以及从发酵液中纯化α-半乳糖苷酶的研究.在4 L无机盐培养基中接种0.4 L pPIC9K-Gal/GS115培养物,最终得到3.5 L发酵液.离心所得上清中总蛋白含量为2.1 g/L.根据发酵液中目的蛋白含量高、杂质少等特点,设计了如下的纯化流程:离心→超滤→阳离子交换层析→脱盐→浓缩.纯化后电泳银染结果呈单一蛋白带,总回收率41%.通过测定米氏常数等生化性质对重组酶进行鉴定后,完成了人B型红细
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