【摘 要】
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目的 观察腺病毒穿梭载体介导RNA干扰对激素诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)成脂分化的影响.方法 选取新西兰兔制备BMSCs并随机分为6组,RNA干扰1组、2组和3组(S1、S2和S3)；无关序列组(Con)；模型组(M)；正常对照组(N).加入激素终质量浓度为1×10-7 mol/L地塞米松.将重组腺病毒穿梭载体转染细胞,采用TaqMan逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernbl
【机 构】
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450001郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,郑州大学第一附属医院骨科,郑州大学第一附属医院骨科,450001郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,450001郑州大学基础医学院生
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目的 观察腺病毒穿梭载体介导RNA干扰对激素诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)成脂分化的影响.方法 选取新西兰兔制备BMSCs并随机分为6组,RNA干扰1组、2组和3组(S1、S2和S3)；无关序列组(Con)；模型组(M)；正常对照组(N).加入激素终质量浓度为1×10-7 mol/L地塞米松.将重组腺病毒穿梭载体转染细胞,采用TaqMan逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot方法分别检测各组BMSCs内过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)mRNA及其蛋白表达,测定细胞甘油三酯含量,用苏丹Ⅲ染色细胞并计数脂肪细胞.结果 处理细胞7d时,S1、S2、S3、Con、M、N组中,PPARγ mRNA相对表达值分别为0.406±0.012、0.401±0.009、0.410±0.042、0.621 ±0.045、0.628±0.008、0.399 ±0.014,PPARγ Western blot灰度扫描值分别为0.246±0.027、0.235±0.015、0.257±0.025、0.800±0.017、0.793 ±0.019、0.244 ±0.010. S1、S2、S3、N组中PPARγ mRNA及其蛋白表达均明显低于M、Con组,差异均有统计学意义(P＜0.05),S1、S2、S3组和N组之间差异无统计学意义(P＞0.05).S1、S2、S3、N组中脂肪细胞计数、甘油三酯含量均明显低于M、Con组,差异均有统计学意义(P＜0.05),S1、S2、S3组和N组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 靶向PPARγ基因的腺病毒穿梭载体介导RNA干扰能够有效地抑制激素诱导的BMSCs成脂分化。
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肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)是肝脏外科手术过程中常见的、多因素参与的病理生理变化,是导致肝移植、肝切除、创伤以及低血容量休克患者肝功能衰竭的主要原因之一.但到目前为止,仍没有任何一种药物或方法能够完全有效的治疗HIRI[1].间充质干细胞(MSCs)是中胚层发育的早期细胞,因能在体内外特定环境下分化为间叶组织而得名.MSCs具有自我扩增和多向分化性,在发育的不同阶段和特定环境条件下,可以分化为多
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目的 探讨甲基硒酸(MSA)对人三阴性乳腺癌(TNBC)的化疗增敏作用及其分子机制.方法 分别采用2.5、3.5、4.0 μmol/L的MSA联合不同浓度的紫杉醇、阿霉素与MDA-MB-231细胞株共培养,分别应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测化疗药物单药和联合MSA用药时细胞增殖抑制率,并通过合用指数的计算,探讨MSA对化疗药物疗效的影响；应用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-F
目的 探讨胃癌中细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白27基因(P27KiP1)蛋白表达、基因突变及启动子甲基化的关系.方法 采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法、聚合酶链式反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术、甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)方法分别检测97例胃癌中P27KiP1基因蛋白表达、基因突变及启动子甲基化,并选取25例正常胃黏膜组织作对照.结果 正常胃黏膜组
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