用DDRT—PCR技术克隆小鼠早期胚胎发育相关基因

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shan12
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mRNA差异显示(DDRT-PCR)技术在哺乳动物早期胚胎发育相关基因研究中的应用,因获得足够量的早期胚胎材料困难而受到限制.通过对DDRT-PCR技术各种条件参数进行优化组合,并对某些环节进行改良,以小鼠的MⅡ卵、2-细胞胚胎和4-细胞胚胎为材料进行差异显示,仅以相当于50个卵细胞的量为起始材料,便得到了理想的差示结果.从差异条带中挑取感兴趣的差异条带进行回收、阳性鉴定、亚克隆、序列分析、并在反向Northern杂交基础上设计了鉴定实验.结果发现,有一个片段差异显著且是阶段性特异表达.经GenBank检
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