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对膨胀床分离纳豆激酶过程的各个阶段进行了考察.在填充床上的探索性实验表明,吸附时最佳的pH为6.0,电导率应低于6.2 mS/cm.在膨胀床上样吸附阶段,考察了保持流速不变和保持床层膨胀率不变2种操作方式,结果表明采用控制膨胀率不变的方法更适合纳豆激酶这种料液的粘度和平衡缓冲液的粘度相差不大的情况;在冲洗阶段,通过考察颗粒冲洗的效率确定采用平衡缓冲液冲洗;洗脱阶段采用填充床模式洗脱.与传统方法相比,用膨胀床对纳豆激酶进行分离和纯化,操作步骤从6步减少为2步,操作时间缩短了8-10 h,回收率提高了约50%